采卵
在确定的时间采卵。采卵的途径有:
剖腹直视下穿刺卵泡取卵;经腹腔镜取卵;B超引导下经腹壁、尿道膀胱或阴道穿刺取卵。
卵子培养
吸出卵泡液后,立即寻找卵子。
取出卵细胞后,需要将其置入装有人工培养液的培养皿内,并放入一定量的卵泡液,有助于卵细胞的生长发育。
培养时间取决于所取卵泡的成熟度,成熟者一般培养2~6小时。
胚胎移植
阴道及宫颈用生理盐水清洁再用培养液擦洗,将金属或塑料导管置入颈管内。培养液,将此管插入宫颈管导管内放至距宫底0.5cm处,送胚胎入宫腔。胚胎移植后需卧床24小时,限制活动3~4天,接受黄体酮治疗。
移植后2周,需要做β-GCG测定,如无妊娠情况,则停用黄体酮。
体外授精
收集精液后应用洗涤法使精液体外获得,然后放入装有卵细胞的培养液内,培养15~24小时,在解剖显微镜下检查,如看到有两个原核存在于卵母细胞原浆中表示已授精,再继续培养36~42小时。
当镜下观察到受精卵已分裂至4~8个细胞时,可考虑作胚胎移植。