二、伊红Y染色法
【准备】
1、用蒸馏水配制4% 伊红 Y 染液。
2、配制0.01mol/L，pH7.4 PBS溶液。
【方法】
1、取正常新鲜精液（精子浓度宜大于：60×106/mL），用pH 7.4的 PBS洗涤 3次，调整精子浓度为10×107/mL。
2、取精子悬液16μL，移置载玻板的漆孔内，分别设2个测定和对照孔，另取待检血清20μL，补体血清4μL 加入测定孔内，对照孔只加待测血清不加补体，充分混匀。
3、把玻板移入湿盒内，在37℃孵育30min，每孔加4%伊红Y 4μL，加上盖玻片使其作用 2min，进行镜检。
找出导致精子制动和死亡的原因
【判断】
由于活精子不着色，死精子着染为红色，计算200个精子中，死精子所占的百分数，减去对照组死精子的百分数，即为抗体杀灭精子的百分率。以杀灭精子≥10% 以上者为阳性。
